【求助】有關(guān)硅膠柱色譜的一些問(wèn)題！急！

相關(guān)回復(fù)：
作者:f2f2fr發(fā)布日期:2008-10-07
自己頂個(gè)
作者:platto發(fā)布日期:2008-10-08
1.裝柱主要有兩種方法，一是濕法裝柱，即將流動(dòng)相和硅膠混合，攪勻，然后沿層析柱壁倒入柱中，二是干法裝柱，即將層析柱烘干先，然后沿柱壁導(dǎo)入干硅膠，整個(gè)過(guò)程不得有任何液體摻入，最后將流動(dòng)相沿柱壁緩慢導(dǎo)入，用洗耳球輕敲柱壁趕走氣泡即可。
2.你的流速慢主要是因?yàn)槟愕墓枘z粒度太小的原因，或者是壓的過(guò)于結(jié)實(shí)了，其實(shí)只要借助硅膠自己的重力就能夠做一根非常好的柱子了。
3.一般情況下沒(méi)有必要用加壓法
4.微量的氣泡一般不會(huì)影響層析的結(jié)果。
作者:f2f2fr發(fā)布日期:2008-10-08
QUOTE:Originallypostedbyplattoat2008-10-808:28:
1.裝柱主要有兩種方法，一是濕法裝柱，即將流動(dòng)相和硅膠混合，攪勻，然后沿層析柱壁倒入柱中，二是干法裝柱，即將層析柱烘干先，然后沿柱壁導(dǎo)入干硅膠，整個(gè)過(guò)程不得有任何液體摻入，最后將流動(dòng)相沿柱壁緩慢導(dǎo)入，...謝謝！那么關(guān)于裝柱，您的建議是就在常壓下裝柱及過(guò)柱了。那么

1.柱子裝好后的流速應(yīng)該在一個(gè)什么水平上呢？比如說(shuō)一分鐘多少滴？硅膠的目
數(shù)應(yīng)該選多大的合適？

2.我有一種產(chǎn)品在TLC上的Rf大概是0.2左右（為保證3種物質(zhì)的完全分離），應(yīng)該
說(shuō)是在柱子上比較難沖下來(lái)了，所以我為了要拿到這種產(chǎn)品必須用大量的洗脫
劑沖，太慢的話(huà)過(guò)一根柱子就要等死了，更不要說(shuō)摸條件了。那么按您的經(jīng)驗(yàn)
看這種情況一根柱子過(guò)下來(lái)要多久呢？

再次感謝！
作者:platto發(fā)布日期:2008-10-08
是在太慢你就把譜帶分開(kāi)后挖出來(lái)。
作者:platto發(fā)布日期:2008-10-08
具體的目數(shù)我去幫你查一下，我們實(shí)驗(yàn)室用的都是統(tǒng)一采購(gòu)的。
作者:platto發(fā)布日期:2008-10-08
我們實(shí)驗(yàn)室用的一般是200~300目。
另外，流速和柱子規(guī)格也是有關(guān)的。
作者:platto發(fā)布日期:2008-10-08
流速的控制只要能夠滿(mǎn)足譜帶分離，節(jié)約時(shí)間就夠了。
還有，你的層析柱下面使用棉花阻隔硅膠還是用現(xiàn)成的砂芯濾片??？
作者:f2f2fr發(fā)布日期:2008-10-08
QUOTE:Originallypostedbyplattoat2008-10-811:05:
流速的控制只要能夠滿(mǎn)足譜帶分離，節(jié)約時(shí)間就夠了。
還有，你的層析柱下面使用棉花阻隔硅膠還是用現(xiàn)成的砂芯濾片?。课矣玫氖敲藁邮⑸?。另外，我的樣品全是無(wú)色透明的，頭疼得要死，只能像瞎子一樣接幾毫升就去濃縮做TLC，所以我才感覺(jué)到慢啊，如果能看到譜帶的話(huà)就好了。我們沒(méi)有紫外照射設(shè)備的
作者:platto發(fā)布日期:2008-10-08
只用棉花就應(yīng)該足夠了。
作者:f2f2fr發(fā)布日期:2008-10-08
QUOTE:Originallypostedbyplattoat2008-10-813:26:
只用棉花就應(yīng)該足夠了。我石英砂都鋪了，裝得還是不好。常壓下裝的話(huà)比較慢，不過(guò)還是應(yīng)該能裝好，減壓下裝就徹底完蛋，下面裂得很厲害。我去看看有沒(méi)有目數(shù)小一些的硅膠，買(mǎi)回來(lái)試試。非常謝謝你！有問(wèn)題的話(huà)再向你請(qǐng)教！
作者:wuyahedatou發(fā)布日期:2008-10-09
你可以適當(dāng)?shù)募訅喊?，那樣可以快點(diǎn)
作者:f2f2fr發(fā)布日期:2008-10-09
QUOTE:Originallypostedbywuyahedatouat2008-10-908:54:
你可以適當(dāng)?shù)募訅喊?，那樣可以快點(diǎn)謝謝。我現(xiàn)在更換了目數(shù)小一些的硅膠，常壓下的流速也基本可以了
作者:f2f2fr發(fā)布日期:2008-10-09
QUOTE:Originallypostedbyplattoat2008-10-811:02:
我們實(shí)驗(yàn)室用的一般是200~300目。
另外，流速和柱子規(guī)格也是有關(guān)的。我現(xiàn)在剛剛換了100-200目的硅膠H，裝柱的效果還可以，流速也有較大的可控性了，看來(lái)硅膠的細(xì)度確實(shí)是有很大的影響。
我之前做TLC用的是硅膠G，現(xiàn)在準(zhǔn)備用柱用硅膠H再做一遍T(mén)LC。您說(shuō)這兩種硅膠在做柱子和TLC有什么區(qū)別嗎？