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確炎舒松A對(duì)瘢痕疙瘩膠原代謝的影響

發(fā)布時(shí)間： 2016-07-11 18:13:23      來源：健康族
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確炎舒松A對(duì)瘢痕疙瘩膠原代謝的影響中華皮膚科雜志1998年第6期第31卷論著摘要作者：張英吳延芳匡瑞霞單位：250013濟(jì)南市中心醫(yī)院整形外科(張英)；青島市皮膚病研究所(吳延芳匡

確炎舒松A對(duì)瘢痕疙瘩膠原代謝的影響

中華皮膚科雜志1998年第6期第31卷論著摘要

作者：張英吳延芳匡瑞霞

單位：250013濟(jì)南市中心醫(yī)院整形外科(張英)；青島市皮膚病研究所(吳延芳匡瑞霞)

腎上腺皮質(zhì)激素在治療瘢痕疙瘩中取得了顯著療效,但對(duì)其作用機(jī)理的看法并不一致。我們選用確炎舒松A(TA)瘢痕組織內(nèi)注射治療4個(gè)月,手術(shù)切取治療前后新鮮瘢痕組織,測(cè)定羥脯氨酸含量及Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白含量,同時(shí)觀察其形態(tài)學(xué)變化,以探討TA對(duì)瘢痕疙瘩膠原代謝影響的機(jī)制。

一、材料和方法

(一)病例：瘢痕疙瘩患者8例，面頰1例、前胸2例、背1例、耳垂3例、下腹1例；男4例，女4例；年齡27～42歲，平均34.5歲；病程5個(gè)月至15年，平均7.8年；正常對(duì)照組取自做其他整形手術(shù)時(shí)切除的正常皮膚(非瘢痕疙瘩患者)，共7例，面頰1例、前胸5例、背1例；男3例，女4例；年齡24～45歲，平均34.5歲。

(二)主要試劑：

1.TA注射液：選用2％利多卡因作為稀釋液，每次注射時(shí)，抽取1mlTA溶液(10mg)與2ml2％利多卡因(40mg)混勻配制成濃度為20％TA注射液。75％酒精消毒皮損后，依次從皮損邊緣處邊進(jìn)針邊將藥物緩慢注入瘢痕組織內(nèi)，直到局部皮膚呈白色。若3ml藥物用完后仍有未注射的皮損，考慮下次治療。

2.每例患者每處皮損平均半月治療1次，4次一個(gè)療程，共治療2個(gè)療程(TA由上海第九制藥廠提供)。

(三)方法：無菌條件下，切取新鮮皮損組織，去凈周圍結(jié)締組織，進(jìn)行預(yù)處理。

1.羥脯氨酸含量測(cè)定：將經(jīng)乙醇脫水、氯仿脫脂的組織置入鹽酸水解，加0.2mol/L氯胺-T氧化，加甲苯，1000r/min離心3分，取水層液煮沸，冷卻，加甲苯振蕩，吸取2ml甲苯層溶液置一干凈試管，加艾氏溶液氧化，溶液將變成不同深度紫紅色，用722紫外分光光度計(jì)測(cè)A560值。

2.Ⅰ、Ⅲ型可溶性膠原蛋白測(cè)定：取出－20℃保存組織用0.5mol/L冰醋酸、胃蛋白酶提取，上清液加NaCl溶液(0.9mol/L)鹽析，沉淀置透析袋，用0.05mol/L冰醋酸透析，真空冷凍干燥，稱重，溶于樣品緩沖液，－20℃保存。Ⅰ型膠原蛋白提?。簩⑸锨逡杭尤隢aCl溶液(2.6mol/L)，離心，收集沉淀，稱重，計(jì)算出相對(duì)濃度。Ⅲ型膠原蛋白提?。喝、?、Ⅲ型混合物懸浮于NaCl溶液(1.7mol/L)，0.05mol/LTris緩沖液(pH7.5)，離心，沉淀即Ⅲ型膠原，稱重。

4.組織形態(tài)學(xué)觀察：新鮮組織分別置10％中性福爾馬林液固定24小時(shí)和6％戊二醛磷酸緩沖液固定過夜，常規(guī)包埋、染色、切片、光鏡及透射電鏡觀察。

二、結(jié)果

1.取10μg/mlL-4-羥脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml，按上述方法測(cè)得A560值分別為：0.039、0.289、0.339、0.66。求得直線回歸方程：Y=－0.052±0.096x，Y：A值，x：羥脯氨酸含量(μg)。

2.TA治療前羥脯氨酸含量為13.61±2.4μg(±s，下同)，對(duì)照組5.2±1.97μg，兩組經(jīng)t檢驗(yàn)，t=7.34，P＜0.01，說明瘢痕疙瘩組織羥脯氨酸含量明顯增高；治療后為6.31±2.4μg，與治療前相比，t=5.88，P＜0.01；與對(duì)照組相比，t=0.95,P＞0.05，說明經(jīng)一個(gè)療程治療，羥脯氨酸含量降低。

3.TA治療前瘢痕組織Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白相對(duì)含量分別為(91.6±2.1)％、(7.8±3.4)％，治療后分別為(80.3±0.72)％、(4.5±1.41)％，治療前后比較均有高度顯著性差異：Ⅰ型膠原蛋白：t=13.5,P＜0.01；Ⅲ型膠原蛋白：t=2.39,P＜0.05，表明TA能降低瘢痕組織膠原蛋白含量，以降低Ⅰ型為主。

4.TA治療前Ⅰ/Ⅲ型膠原比值為：12.6±2.04，對(duì)照組比值為4.07±1.43，兩組經(jīng)t檢驗(yàn)，t=8.72,P＜0.01。說明瘢痕組織Ⅰ/Ⅲ型膠原比值明顯增高；治療后Ⅰ/Ⅲ比值為11.33±2.07，與治療前相比，t=2.04,P＞0.05，，表明Ⅰ/Ⅲ膠原比值經(jīng)1個(gè)療程治療有降低趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

5.光鏡顯示瘢痕疙瘩組織表皮突減少，甚至消失，真皮層膠原纖維大量增生，呈旋渦狀，玻璃樣變性。成纖維細(xì)胞數(shù)目增多且排列不規(guī)律。早期病變有豐富毛細(xì)血管及炎細(xì)胞浸潤，長期病變真皮乳頭層幾乎消失，血管大多閉塞。電鏡下瘢痕組織成纖維細(xì)胞形態(tài)肥大，胞質(zhì)內(nèi)充滿大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，高爾基體發(fā)達(dá)，核變大，染色質(zhì)不均勻。TA治療后成纖維細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器開始萎縮，微絲增多，纖維細(xì)胞數(shù)目相對(duì)增多。

三、討論

瘢痕疙瘩膠原蛋白主要由Ⅰ、Ⅲ型組成，正常皮膚Ⅰ、Ⅲ型膠原含量比約4∶1，以Ⅰ型含量為主。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)治療后Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白含量明顯降低，說明激素因影響膠原蛋白代謝，使膠原含量降低達(dá)到治療目的。至于激素是如何控制膠原蛋白含量，是對(duì)基因轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行調(diào)控還是對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行降解，還有待進(jìn)一步研究。

本課題由山東省衛(wèi)生廳資助，魯衛(wèi)科教字(1996)第12號(hào)

(收稿：1997-12-01修回：1998-06-01)

（責(zé)任編輯：zxwq）

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