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性罪錯婦女生殖道人乳頭瘤病毒檢測及型別分析

發(fā)布時間： 2016-07-11 18:14:52      來源：健康族
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性罪錯婦女生殖道人乳頭瘤病毒檢測及型別分析中華皮膚科雜志1998年第3期第31卷論著摘要作者：張麗芳鄭飛云林巧愛朱雪瓊陳素華包其郁單位：325003溫州醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室(張麗芳

性罪錯婦女生殖道人乳頭瘤病毒檢測及型別分析

中華皮膚科雜志1998年第3期第31卷論著摘要

作者：張麗芳鄭飛云林巧愛朱雪瓊陳素華包其郁

單位：325003溫州醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室(張麗芳林巧愛包其郁)；溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科(鄭飛云)；溫州醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科(朱雪瓊陳素華)

為了解人乳頭瘤病毒(HPV)及其型別在本地區(qū)高危人群中的流行情況，我們采用HPV的共同引物(generalprimer,GP)對41例性罪錯婦女、46例對照組宮頸標(biāo)本進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測，再用型特異性引物(SP)6、11、16、18對GP-HPV陽性標(biāo)本進(jìn)行擴(kuò)增分型，現(xiàn)報道如下。

一、材料和方法

1.標(biāo)本來源：于1996年12月，隨機(jī)選擇溫州市婦女勞教所性罪錯婦女41例，年齡18～40歲，刮取宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本，共41份；同時隨機(jī)選擇本院附屬二院婦科門診要求體檢的育齡婦女46例，作為正常人

表1各組生殖道標(biāo)本HPV及其型別檢出結(jié)果

組別例數(shù)GP-HPV(+)各型HPV檢出數(shù)多重型別檢出數(shù)(二型以上)例數(shù)%6111618其它性罪錯組412663.45771468正常人群組4636.5001020χ2=31.58，P＜0.01

表2性罪錯婦女性伴數(shù)與生殖道HPV及其型別的檢出關(guān)系

性伴數(shù)例數(shù)GP-HPV(+)各型HPV檢出數(shù)多重型別檢出數(shù)(二型以上)例數(shù)%6111618其它2～1015640.004112111～30151066.722452531～111090.9312822χ2=7.20，P＜0.05群對照。

2.標(biāo)本處理：脫落細(xì)胞標(biāo)本用pH7.0、66mmol/L的PBS緩沖液洗滌、離心，經(jīng)蛋白酶K55℃作用3小時后，于95℃10分鐘滅活，收集離心后上清液，-20℃保存?zhèn)溆?，作為PCR模板。

3.引物合成：本研究HPV引物由美國Loyola大學(xué)醫(yī)學(xué)研究中心周健博士惠贈，GP擴(kuò)增139-145bp，序列為：5′-TTTGTTACTGTGGTAGATAC-3′、5′-GA

AAAATAAACTGTAAATCA-3′；SP6擴(kuò)增280bp，序列為：5′-TTTGTTACTGTGGTAGATAC-3′、5′-GAAAAATAAACTGTAAATCA-3′；SP11擴(kuò)增360bp，序列為：5′-GGAATACATGCGCCATGTGC-3′、5′-CGAGCAGACGTCCGTCCTCG-3′；SP16擴(kuò)增152bp，序列為：5′-TGCTAGTGCTTATGCAGCAA-3′、5′-ATTTACTGCAACATTGGTAC-3′；SP18擴(kuò)增216bp，序列為：5′-AAGGATGCTGCACCGGCTGA-3′，5′-CACGCACACGCTTGGCAGGT-3′。

4.PCR操作：每50μl反應(yīng)體系中，含引物50μmol/L，dNTP200μmol/L，Taq酶1.5U，模板用量10μl；反應(yīng)步驟為92℃60秒變性，55℃120秒復(fù)性，72℃90秒引物延伸，共進(jìn)行35個循環(huán)。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳，溴乙錠染色，在紫外反射儀下觀察記錄。

5.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：各組別HPV檢出率的比較，采用χ2檢驗(yàn)。

二、結(jié)果

1.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物分析：GP、SP6、SP11、SP16、SP18五組引物均能準(zhǔn)確擴(kuò)增出相應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物，反應(yīng)結(jié)果清晰易辨，見圖1。

2.各組標(biāo)本HPV及型別陽性檢出率見表1。性罪錯組HPV陽性檢出率(63.4%)較對照組(6.5%)有顯著性差異(χ2=31.58，P＜0.01)；HPV型別以18型檢出為多見，占HPV陽性的53.8%(14/26)；二型以上的多重型別檢出率為30.8%(8/26)，其中HPV16+18、6+18、6+16+18、6+11+16+18各1例，11+16、6+11+18各2例。

3.性伴數(shù)與HPV及其型別的檢出關(guān)系見表2。隨著性伴人數(shù)(據(jù)受檢者主訴)1、3、5、7、9分別為SP6、SP11、SP18、SP16、GP五組引物擴(kuò)增的HPV陽性對照；2、4、6、8、10分別為相應(yīng)引物擴(kuò)增的HPV陽性標(biāo)本；11、12為GP引物擴(kuò)增的陰性標(biāo)本

圖1PCR擴(kuò)增產(chǎn)物分析

的增加，HPV的陽性檢出率呈上升趨勢，經(jīng)檢驗(yàn)有顯著性差異(χ2=7.20，P＜0.05)；尤以HPV18的陽性檢出率隨性伴數(shù)增高而增高(χ2=12.32，P[WTBZ＜0.01)。

三、討論

近年來研究已表明，HPV是STD病原之一，其某些型別與宮頸上皮的不典型增生及宮頸癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)。通常認(rèn)為HPV16和18是致癌的高危型別，而HPV6、11則是致癌的低危型別。國外學(xué)者對HPV與性傳播的相關(guān)性作過許多研究，發(fā)現(xiàn)HPV是婦女生殖道最常見的STD病原。Baken等［1］報道采用PCR方法檢測HPV，在STD門診女性患者中陽性檢出率高達(dá)72%。本文性罪錯婦女宮頸HPV的陽性檢出率為63.4%，高危型別的檢出占HPV陽性的80.5%(21/26)，尤以HPV18型的檢出為高，占其中的53.8%(14/26)。表明性罪錯人群HPV感染以高危型別、尤其18型為主。

多數(shù)研究表明HPV感染與性伴數(shù)關(guān)系最為密切［1～3］。Evander等［2］對276例婦女進(jìn)行2年的追蹤調(diào)查，發(fā)現(xiàn)HPV16是感染的主要型別。Franco等［3］對718例無癥狀婦女進(jìn)行HPV感染研究后提出，HPV的感染與多個性伴及初次性交年齡相關(guān)，尤其高危型別感染與之具顯著相關(guān)性。本文性罪錯婦女中，HPV的陽性檢出率較對照組有顯著性差異(P＜0.01)；且隨性伴人數(shù)增加而增高。提示HPV感染與性傳播有關(guān)。

參考文獻(xiàn)

1BakenLA,KoutskyLA,KuypersJ,etal.Genitalhumanpapillomavirusinfectionamongmaleandfemalesexpartners:prevalenceandtypespecificconcordance.JInfectDis,1995,171∶429-432.

2EvanderM,EdlundK,GustafssonA,etal.Humanpapillomavirusinfectionistransientinyoungwoman:apopulation-basedcohortstudy.JInfectDis,1995,171∶1026-1030.

3FrancoEL,VillaLL,RuizA,etal.Transmissionofcervicalhumanpapillomavirusinfectionbysexualactivity:differencesbetweenlowandhighoncogenicrisktypes.JInfectDis,1995,172∶756-763.

（責(zé)任編輯：zxwq）

標(biāo)簽閱讀: 性罪錯婦女生殖道人乳頭瘤病毒檢測及型別分析，最新性罪錯婦女生殖道人乳頭瘤病毒檢測及型別分析，關(guān)于性罪錯婦女生殖道人乳頭瘤病毒檢測及型別分析的資訊

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