人類免疫缺陷病毒抗體口腔粘膜滲出液診斷試劑盒(膠體金法)是基于免疫層析技術(shù)通過手工操作、肉眼讀取結(jié)果、20分鐘即可定性(陰性/陽性)得出檢測結(jié)果的快速診斷試劑,用于檢測口腔粘膜滲出液樣本中的HIV-1型和HIV-2型抗體??谇粯颖局蠬IV抗體的濃度是血液樣本濃度的1/1000。本品主要由檢測試紙條,樣本緩沖液以及采集樣本的口腔拭子組成。本試驗(yàn)是利用側(cè)向流動免疫反應(yīng)的原理進(jìn)行的。
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在硝酸纖維素膜的檢測區(qū)包被了HIV-1 gp41和HIV-2 gp36重組抗原,在對照區(qū)包被了羊抗人IgG F(ab’)2片斷多抗。檢測時,用口腔拭子擦拭受試者的上、下牙齦線,然后將口腔拭子放入盛有約1000 μl樣本緩沖液的試管里,在試管內(nèi)混合均勻,將口腔拭子內(nèi)的液體擠干后,扔掉拭子。將大約200 μl的樣本混合液轉(zhuǎn)移到潔凈的試管里進(jìn)行檢測。
將檢測試紙條垂直插入裝有樣本混合液的試管里,試紙上的淡紅色蛋白A-膠體金標(biāo)記物會溶解,樣本中的IgG(樣本中其他抗體如IgA、IgM的反應(yīng)原理與IgG相同)同蛋白A/膠體金粒子結(jié)合在一起,形成“IgG-蛋白A-金”復(fù)合物,“IgG-蛋白A-金”復(fù)合物沿著試紙條向上方移動,首先到達(dá)包被了HIV抗原的檢測區(qū)。如果樣本中含有HIV的抗體,“IgG-蛋白A-金”復(fù)合物將同抗原結(jié)合,并在檢測線上滯留下來,形成一條淡紅色的線,這表示陽性結(jié)果。線條顏色的深淺同樣本中的抗體數(shù)量沒有比例關(guān)系。
檢測區(qū)里如果沒有帶顏色的線條表示樣本中不含HIV抗體,游離的“IgG-蛋白A-金”復(fù)合物繼續(xù)向試紙上方移動,到達(dá)試紙的對照區(qū)。對照區(qū)包被了羊抗人IgG F(ab’)2片斷,固定在試紙條的對照線上。“IgG-蛋白A-金”復(fù)合物將同羊抗人IgG F(ab’)2片斷結(jié)合在一起而富集在對照線上,形成一條淡紅色的線。對照線的出現(xiàn)證明試紙條檢測功能正常。無論樣本中是否含有HIV-1/2抗體,在有效試驗(yàn)中,試紙條的對照區(qū)都應(yīng)當(dāng)出現(xiàn)淡紅至紫色的對照線。樣本繼續(xù)移動,通過對照區(qū)進(jìn)入吸收區(qū)。吸收區(qū)的作用是吸附剩余的“IgG-蛋白A-金”復(fù)合物,使其在試紙條內(nèi)移動,并消除本底的顏色。
自試紙條插入稀釋后的樣本混合液起計時,20分鐘后方可讀取結(jié)果.
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