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銀屑病患者外周血淋巴細(xì)胞分析

發(fā)布時(shí)間： 2016-07-11 18:12:50      來(lái)源：健康族
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銀屑病患者外周血淋巴細(xì)胞分析中華皮膚科雜志1998年第2期第31卷論著摘要作者：劉華昌李冠勇尹格平姜磊單位：250031濟(jì)南，濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院皮膚科(劉華昌李冠勇)，流式細(xì)胞研究室(

銀屑病患者外周血淋巴細(xì)胞分析

中華皮膚科雜志1998年第2期第31卷論著摘要

作者：劉華昌李冠勇尹格平姜磊

單位：250031濟(jì)南，濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院皮膚科(劉華昌李冠勇)，流式細(xì)胞研究室(尹格平)，免疫科(姜磊)

我們對(duì)銀屑病患者外周血T細(xì)胞活化、T細(xì)胞亞群、B細(xì)胞及免疫球蛋白(Ig)進(jìn)行了研究，旨在進(jìn)一步了解免疫機(jī)理在銀屑病發(fā)病中的作用。

一、資料和方法

1.觀察對(duì)象：56例尋常型銀屑病患者，均為我院門診及住院患者，男30例，女26例；年齡16～65歲，平均36歲；病程10天至40年；其中進(jìn)行期33例，靜止期23例；泛發(fā)性32例，局限性24例。另選健康對(duì)照者51例，男28例，女23例；年齡17～64歲，平

附表銀屑病患者外周血T細(xì)胞亞群、HLA-DR+細(xì)胞及B細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果(±s，%)

組別例數(shù)CD3+CD4+CD8+CD3+/HLA-DR+CD19+健康對(duì)照組5164.35±4.7441.42±4.9323.88±2.521.53±0.5716.31±1.81銀屑病組5665.65±5.3240.85±5.6326.52±3.0512.14±1.7515.83±1.96t值-1.32940.55484.8537**42.9381**1.3122進(jìn)行期3365.82±4.6339.51±5.0327.33±2.9814.36±1.4915.89±1.84靜止期2365.48±4.8941.19±4.9125.71±2.679.92±1.3815.77±1.67t值-0.26421.24162.0870*11.3035**0.2492泛發(fā)性3266.05±5.0139.87±4.8327.38±2.8115.52±1.4115.91±1.69局限性2465.28±4.7840.83±5.0125.66±2.928.76±1.4315.75±1.86t值-0.58030.72442.2291*17.6455**0.3358*P＜0.05，**P＜0.01均35歲。兩組均排除系統(tǒng)性疾病史。抽血前2個(gè)月內(nèi)均無(wú)應(yīng)用皮質(zhì)類固醇、免疫抑制劑及細(xì)胞毒性藥物史。

2.實(shí)驗(yàn)方法：

(1)樣本采集：晨起采集靜脈血5ml，3ml用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)，2ml用于免疫球蛋白檢測(cè)。

(2)流式細(xì)胞儀檢測(cè)T細(xì)胞活化(HLA-DR表達(dá))、T細(xì)胞亞群及B細(xì)胞：試劑：①T細(xì)胞亞群：異硫氰酸熒光素(FITC)、R-藻紅蛋白(PE)和R-藻紅蛋白-花青苷5(PE-Cy5)三色標(biāo)記的鼠抗人單抗：CD4(抗輔助/誘導(dǎo)性T細(xì)胞)-FITC/CD8(抑制/細(xì)胞毒性T細(xì)胞)-PE/CD3(全T細(xì)胞)-PE-Cy5及上述三種熒光標(biāo)記陰性對(duì)照羊抗鼠IgG１。②HLA-DR+T細(xì)胞：CD3-FITC/HLA-DR-PE以及雙色標(biāo)記的陰性對(duì)照羊抗鼠IgG１。③B細(xì)胞：CD19-FITC及陰性對(duì)照羊抗鼠IgG１。流式細(xì)胞儀：美國(guó)Becton-Dickinson公司產(chǎn)FACScan型。上機(jī)后收集20000個(gè)細(xì)胞，熒光強(qiáng)度以對(duì)數(shù)放大，光散射數(shù)據(jù)存軟盤，測(cè)試完后在MacIntosh650計(jì)算機(jī)上用CellQutstplot軟件(BD公司產(chǎn))分析數(shù)據(jù)，由HP1200c/ps打印結(jié)果。

(3)免疫球蛋白檢測(cè)：采用法國(guó)產(chǎn)SanofeiQM-300型特定蛋白測(cè)定儀，用激光速率免疫比濁法。

3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用t檢驗(yàn)、t′檢驗(yàn)。

二、結(jié)果

1.銀屑病患者T細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果：患者外周血CD8+細(xì)胞百分率較對(duì)照組顯著增高(P＜0.01)；進(jìn)行期患者CD8+細(xì)胞百分率顯著高于靜止期患者(P＜0.05)；泛發(fā)性患者CD8+細(xì)胞百分率顯著高于局限性患者(P＜0.05)；患者CD3+、CD4+細(xì)胞百分率與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；進(jìn)行期與靜止期、泛發(fā)性與局限性患者CD3+、CD4+細(xì)胞百分率亦無(wú)顯著性差異(P均＞0.05)。

2.銀屑病患者CD3+/HLA-DR+細(xì)胞百分率較對(duì)照組顯著增高(P＜0.01)；進(jìn)行期患者CD3+/HLA-DR+細(xì)胞百分率明顯高于靜止期患者(P＜0.01)；泛發(fā)性患者CD3+/HLA-DR+細(xì)胞百分率明顯高于局限性患者(P＜0.01)。

3.銀屑病患者B細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果：患者CD19+細(xì)胞百分率與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；進(jìn)行期與靜止期、泛發(fā)性與局限性患者CD19+細(xì)胞百分率亦無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。詳細(xì)結(jié)果見附表。

4.銀屑病患者IgG、IgA、IgM水平與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P＞0.05，具體數(shù)值略)；進(jìn)行期與靜止期、泛發(fā)性與局限性患者IgG、IgA、IgM水平亦無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。

三、討論

銀屑病患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的研究結(jié)果尚存爭(zhēng)論。已有研究報(bào)道銀屑病患者外周血CD3+、CD4+及CD8+細(xì)胞均減少［1］，Horrocks［2］等報(bào)道銀屑病患者外周血CD3+、CD4+細(xì)胞數(shù)量或百分率均無(wú)顯著異常。我們的結(jié)果顯示銀屑病患者外周血CD3+、CD4+細(xì)胞百分率無(wú)明顯變化，但CD8+細(xì)胞卻明顯增多，且與病情有關(guān)，與Jeffes［3］等的研究結(jié)果一致。淋巴細(xì)胞粘附于血管內(nèi)皮是其通過(guò)微血管到達(dá)炎性部位的重要步驟。已有研究發(fā)現(xiàn)CD4+細(xì)胞粘附于銀屑病真皮微血管內(nèi)皮的能力是CD8+細(xì)胞的4倍［4］。

眾多資料顯示，銀屑病皮損內(nèi)浸潤(rùn)的淋巴細(xì)胞主要是HLA-DR+細(xì)胞，提示這些細(xì)胞處于活化狀態(tài)［3］。但這些細(xì)胞是進(jìn)入皮損之前就已活化，還是進(jìn)入皮損之后才開始活化尚不清楚［3］。我們的研究結(jié)果顯示，銀屑病患者外周血HLA-DR+T細(xì)胞明顯增多，與Kasteler［5］等的結(jié)果一致，提示淋巴細(xì)胞在進(jìn)入皮損前已經(jīng)活化。

參考文獻(xiàn)

1BorroniG,BrazzelliV,FiettaA,etal.Effectsofmedium-termPUVAtherapyonperipheralT-lymphocytesubsetsinpsoriaticpatients.ActaDermatolVenereol(Stockh),1989,Suppl146∶125-129.

2HorrocksC,DuncanJI,SwellHF,etal.DifferentialeffectsofcyclosporineAonLangerhanscellsandregulatoryT-cellpopulationsinseverepsoriasis:animmunohistochemicalandflowcytometricanalysis.JAutoimmun,1990,3∶559-563.

3JeffesⅢEWB,LeeGC,SaidS,etal.Elevatednumbersofproliferatingmononuclearcellsintheperipheralbloodofpsoriaticpatientcorrelatewithdiseaseseverity.JInvestDermatol,1995,105∶733-738.

4ChinYH,FalangaV,TaylorJR,etal.Adherenceofhumanhelper/memoryT-cellsubsetstopsoriaticdermalendothelium.JInvestDermatol,1990,94∶413-417.

5KastelerJS,PetersenMJ,VanceJE,etal.CirculatingactivatedTlymphocytesinautoeczematization.ArchDermatol,1992,128∶795-798.

(收稿：1997-01-06修回：1997-06-17)

（責(zé)任編輯：zxwq）

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