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銀屑病患者皮損組織中總RNA水平分析

發(fā)布時間： 2016-07-11 18:13:21      來源：健康族
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銀屑病患者皮損組織中總RNA水平分析中華皮膚科雜志1998年第2期第31卷論著摘要作者：汪治中鄭茂榮焦炳華繆為民孫君紅單位：200433上海，第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長海醫(yī)院皮膚科(汪治中

銀屑病患者皮損組織中總RNA水平分析

中華皮膚科雜志1998年第2期第31卷論著摘要

作者：汪治中鄭茂榮焦炳華繆為民孫君紅

單位：200433上海，第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長海醫(yī)院皮膚科(汪治中鄭茂榮孫君紅)，微生物學(xué)教研室(焦炳華繆為民)

生物細(xì)胞的表型及其變化均由嚴(yán)密調(diào)控的基因表達(dá)所決定，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA是遺傳信息從DNA流向蛋白質(zhì)的重要媒介。我們抽提了12例銀屑病患者皮損組織中的總RNA，發(fā)現(xiàn)其皮損組織中存在著十分活躍的轉(zhuǎn)錄過程。

一、研究對象

實(shí)驗(yàn)組為經(jīng)臨床及組織病理學(xué)檢查證實(shí)為進(jìn)行期尋常型銀屑病且未經(jīng)治療的患者12例，均為男性，年齡22～41歲，病程14～90天。取皮部位為背部。取材方法：常規(guī)消毒局麻后，取受累皮膚損害中心處，未受累皮膚取自正常皮膚端，二者交界處皮膚棄之不用。標(biāo)本為全層皮膚，取下后立即置液氮中保存?zhèn)溆?。對照組12例，均為正常人，性別、年齡和取材部位均與實(shí)驗(yàn)組匹配。

二、材料和方法

組織自液氮中取出置于離心管中，立即在電子天平上稱重，然后仍置液氮中備用。按文獻(xiàn)［1］分次行總RNA抽提和甲醛變性凝膠電泳，每3個標(biāo)本一次完成(A、B、C組對應(yīng)例數(shù)各1)。分別測A260和A280，A260為1時RNA濃度為40μg/ml。

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用方差分析和Newman-Keuls檢驗(yàn)。

四、結(jié)果

(一)各組標(biāo)本抽提的總RNA量均值見附表，經(jīng)方差分析，F(xiàn)處理=50.7223，P＜0.01，說明三組皮膚標(biāo)本平均總RNA值有非常顯著性差異；F單位=1.0498，P＞0.05，說明就不同患者而言，相應(yīng)部位的皮膚標(biāo)本中平均總RNA值無顯著性差異。

(二)三組皮膚標(biāo)本總RNA量的總體均數(shù)存在差別，經(jīng)Newman-Keuls檢驗(yàn)，QAC=12.2620，P＜0.01，說明皮損組與對照組的總RNA量均數(shù)差異有顯著性；QAB=12.4079，P＜0.01，說明皮損組與非皮損組的總RNA量均數(shù)之間亦存在顯著性差異；QCB=0.1459，P＞0.05，說明非皮損組與對照組總RNA均數(shù)之間差異無顯著性。

(三)所有標(biāo)本的總RNA樣品在甲醛變性凝膠電泳后均清楚顯示18S和28S兩條主帶，A260／A280之比多在1.6～2.0之間。同等量組織標(biāo)本的總RNA電泳后，皮損組的熒光強(qiáng)度遠(yuǎn)高于另兩組。

五、討論

陳軍等［2，3］在1997年發(fā)現(xiàn)CyclinD和

附表銀屑病患者皮損與非皮損部皮膚組織總RNA的含量(±s)

組別病例總RNA單位含量(μg/g)銀屑病皮損組(A)12343.3504±273.1365銀屑病非皮損組(B)1240.5195±10.4517正常人皮膚組(C)1244.0806±13.1870cDK４多肽及CyclinE蛋白質(zhì)在銀屑病皮損中的過表達(dá)現(xiàn)象［3，4］。蛋白質(zhì)水平的代謝狀況正成為銀屑病的研究熱點(diǎn)。我們的工作初步表明了在銀屑病皮損組總RNA均數(shù)顯著高于另兩組，其極大值約為正常對照組均數(shù)的12倍，其旺盛的轉(zhuǎn)錄活性與活躍的蛋白代謝相對應(yīng)。皮損組總RNA的95%單側(cè)下限為70.2139μg/g，高于正常人對照組上限57.2676μg/g，說明皮損組的數(shù)值測定較為可靠。皮損組極大值與極小值差距較大，因而所表現(xiàn)的個體差異也較大。雖然有人發(fā)現(xiàn)銀屑病未受累皮膚也有代謝的改變［4］，但我們的工作還不能在轉(zhuǎn)錄水平上提供證據(jù)，是否在非皮損組總RNA中存在某單種RNA成分的改變，尚需要進(jìn)一步的工作。國家自然科學(xué)基金資助課題(39670674)

參考文獻(xiàn)

1NickoloffBJ,KarabinGD,BarkerJNWN,etal.Cellularlocalizationofinterleukin-8anditsinducer,tumornecrosisfactor-alphainpsoriasis.AmJPathol,1991,138∶129-140.

2陳軍,桑建利,王永潮,等.CyclinD和CDK４mRNA及其多肽在銀屑病皮損表皮中的過表達(dá).中華皮膚科雜志,1997,30∶118-119.

3陳軍,桑建利,王永潮,等.CyclinE和CDK２mRNA及蛋白質(zhì)在銀屑病皮損表皮中的表達(dá).中華皮膚科雜志,1997,30∶119-120.

4劉鎮(zhèn)修,宗志宏,李炎夏,等.銀屑病患者皮損與非皮損區(qū)皮膚中蛋白激酶C活性.中華皮膚科雜志,1997,30∶111-112.

(收稿：1997-08-27修回：1997-12-16)

（責(zé)任編輯：zxwq）

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