1.涂片與培養(yǎng)從漿膜腔液中找到抗酸桿菌是診斷結(jié)核病的重要手段，但陽(yáng)性率低，僅20%～30%。此外，尚可將標(biāo)本接種豚鼠做結(jié)核菌培養(yǎng)，結(jié)核菌生長(zhǎng)緩慢，4～6周后才出現(xiàn)典型病理改變。近年來應(yīng)用的Bactec460快速培養(yǎng)鑒定系統(tǒng)，采用有放射性營(yíng)養(yǎng)物(14C棕櫚酸)為底物的7H12分枝桿菌培養(yǎng)基，結(jié)核菌生長(zhǎng)期可縮短至1～3周，檢測(cè)結(jié)核桿菌需9天，可鑒別結(jié)核桿菌與非結(jié)核分枝桿菌，藥敏試驗(yàn)另需3～5天。1991年應(yīng)用雙相培養(yǎng)技術(shù)Rocheseptichek-AFB系統(tǒng)快速分離結(jié)核桿菌，可在2～4周出報(bào)告?？顾峋鶯型菌是細(xì)胞和菌落形態(tài)的一種變異，用常規(guī)方法難于培養(yǎng)，抗酸染色不易被發(fā)現(xiàn)。國(guó)內(nèi)應(yīng)用改良的胰胨大豆蛋白瓊脂培養(yǎng)基(TSA-L)、快速蛋白胨瓊脂牛血清培養(yǎng)基、羊血培養(yǎng)基分離培養(yǎng)L型結(jié)核桿菌，1998年報(bào)道在260例復(fù)治、難治肺結(jié)核病人中培養(yǎng)出L型結(jié)核桿菌，陽(yáng)性率29.6%。
2.結(jié)核桿菌抗體檢測(cè)過去用天然抗原PPD等檢測(cè)抗體(PPD-IgG、PPD-IgM)，敏感性及特異性均差。近十余年來由于制備了結(jié)核桿菌的純化或半純化的抗原，使結(jié)核桿菌特異性抗體檢測(cè)有了顯著進(jìn)展。目前常用的抗原有半純化的結(jié)核桿菌抗原5、抗原6、AOO抗原;半純化的糖脂抗原如糖脂SAGA1、B1和C、酚糖脂(PGL-Tb1)、脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原、硫脂類(SL-Ⅰ、SL-Ⅳ)、TB-C-1抗原、脂多糖(LPS)等;純化的抗原有結(jié)核蛋白抗原(38kDa、30/31kDa、71kDa、45kDa、14kDa、19kD3a結(jié)核桿菌抗原)、重組38kDa結(jié)核蛋白。
(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)：用于檢測(cè)結(jié)核病人血清、腦脊液及漿膜腔液中的抗結(jié)核抗體，可作為輔助診斷指標(biāo)。應(yīng)半純化抗原的ELISA的敏感性為65%～85%，對(duì)痰涂片陰性的肺結(jié)核敏感性為53%～62%，對(duì)肺外結(jié)核病敏感性為34%～40%，特異性95%。應(yīng)用38kDa純化抗原的ELISA檢測(cè)抗體，敏感性為73%，對(duì)痰涂片陰性的肺結(jié)核敏感性為70%，特異性98%。應(yīng)用抗原5的ELISA檢測(cè)結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中特異性抗體，敏感性70%，特異性100%。
(2)酶聯(lián)免疫電泳技術(shù)(ELIEP)：是將ELISA與電泳結(jié)合起來的一項(xiàng)免疫技術(shù)，是各種結(jié)核病輔助診斷的血清學(xué)方法。
3.結(jié)核桿菌抗原檢測(cè)應(yīng)用ELISA、乳膠凝集試驗(yàn)、反向被動(dòng)血凝試驗(yàn)等方法檢測(cè)體液中的結(jié)核桿菌抗原。如應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)腦脊液中的結(jié)核桿菌34kDa細(xì)胞漿蛋白(抗原5)以診斷結(jié)核性腦膜炎，敏感性80%，特異性100%。用雙抗體夾心ELISA方法檢測(cè)腦脊液、腹水、胸腔積液中的結(jié)核桿菌43kDa免疫顯性抗原，敏感性100%，特異性96%。應(yīng)用協(xié)同凝集試驗(yàn)測(cè)定脂阿拉伯甘露聚糖抗原，敏感性85%～90%，特異性93%。應(yīng)用免疫印跡技術(shù)(Westernblot)檢測(cè)結(jié)核桿菌抗原，敏感性89.7%，特異性95.7%，對(duì)肺外結(jié)核、痰涂片陰性肺結(jié)核病有診斷意義。
4.結(jié)核桿菌結(jié)構(gòu)成分測(cè)定應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜分析的方法，檢測(cè)血清、腦脊液中結(jié)核桿菌的菌體結(jié)構(gòu)成分，即結(jié)核硬脂酸(10-甲基十八烷酸)，具有較高的特異性及敏感性。應(yīng)用頻率脈沖電子捕獲氣相色譜法測(cè)定腦脊液中結(jié)核桿菌的羧酸，敏感性95%，特異性91%，但所需設(shè)備及技術(shù)復(fù)雜、昂貴。
5.分子生物學(xué)檢查
(1)DNA探針分子雜交：DNA探針方法檢測(cè)臨床標(biāo)本的敏感性不高，標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)1萬/ml時(shí)才呈陽(yáng)性。用吖啶酯(acridiniumester)標(biāo)記的基因探針技術(shù)及化學(xué)發(fā)光測(cè)定系統(tǒng)取代酶標(biāo)顯色系統(tǒng)，可提高敏感性，能鑒定多種分枝桿菌，快速檢測(cè)結(jié)核桿菌。應(yīng)用細(xì)菌熒光酶檢測(cè)雜交信號(hào)，可提高敏感性100倍。
(2)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)：選擇性地?cái)U(kuò)增對(duì)結(jié)核桿菌復(fù)合物有特異性的MPB64蛋白質(zhì)的編碼基因片段，能將此極微量的DNA樣品放大幾十萬倍以上，數(shù)小時(shí)可得結(jié)果，快速、敏感、特異性強(qiáng)。但較易產(chǎn)生假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果。應(yīng)用PCR擴(kuò)增結(jié)核桿菌特異性插入序列IS6110，檢測(cè)痰標(biāo)本，陽(yáng)性率93%，假陽(yáng)性率2.9%。國(guó)內(nèi)馬路應(yīng)用巢式PCR測(cè)定病理標(biāo)本、痰標(biāo)本等的結(jié)核桿菌DNA，無假陽(yáng)性。有人應(yīng)用巢式PCR檢測(cè)結(jié)核病人外周血單個(gè)核細(xì)胞中結(jié)核桿菌的特異性重復(fù)插入序列IS6110，陽(yáng)性率64%，高于痰涂片的32%與痰培養(yǎng)的35%。(3)DNA指紋技術(shù)：分析細(xì)菌染色體的限制性內(nèi)切酶酶切片段的特異性帶譜如DNA插入序列IS6110，以鑒定菌株，用于流行病學(xué)研究。
(4)結(jié)核桿菌耐藥基因檢測(cè)：應(yīng)用PCR-單鏈構(gòu)象多態(tài)性(PCR-SSCP)分析、PCR-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析、PCR-DNA序列測(cè)定，研究結(jié)核桿菌耐藥基因。
(5)基因芯片(genechip)技術(shù)：將許多DNA探針以一定順序及排列方式固定于固相載體上，構(gòu)成探針矩陣，與待測(cè)DNA雜交，可同時(shí)獲得大量基因信息。1999年美國(guó)研制了測(cè)定分枝桿菌種間多態(tài)性的16SrRNA基因芯片，用于鑒定結(jié)核桿菌與其他非結(jié)核分枝桿菌。另一種為分析耐藥結(jié)核菌株rpoB基因型的基因芯片，用于分析rpoB基因突變。
6.血沉結(jié)核病活動(dòng)期血沉可以加快?？菇Y(jié)核治療后，血沉逐漸下降，則更說明原來有活動(dòng)性病變。血沉檢查無特異性，血沉正常不能除外活動(dòng)性結(jié)核。
腹部X線平片中多發(fā)性、大小不一的鈣化灶對(duì)確診有幫助。在鑒別診斷中應(yīng)與腸系膜淋巴結(jié)炎、急慢性闌尾炎、腸梗阻等區(qū)別，腹腔如有巨大包塊應(yīng)與淋巴肉瘤、神經(jīng)纖維瘤鑒別。B超可見腫大的淋巴結(jié)或腹水。
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